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懸浮細胞和貼壁細胞基礎知識介紹

更新時間:2024-03-16   點擊次數:154次

體外培養細胞,根據它們是否能貼附在支持物上生長的特性,可分為懸浮型貼壁型兩大類。

(一)懸浮型細胞

簡稱懸浮細胞(bao)(bao)。在體外培養時,這些細胞(bao)(bao)屬于(yu)(yu)非貼(tie)壁(bi)依賴的(de)(de)細胞(bao)(bao),這些細胞(bao)(bao)的(de)(de)細胞(bao)(bao)質膜也(ye)會(hui)與(yu)培養液底發生(sheng)黏連,但最多不(bu)超過5%的(de)(de)表面與(yu)培養液底發生(sheng)類似于(yu)(yu)細胞(bao)(bao)連接樣的(de)(de)黏連,顯微視場下(xia)細胞(bao)(bao)往往呈(cheng)球形。

懸浮型細胞主要是來源于血液、淋(lin)巴組(zu)織的細胞,骨髓瘤構建的各種雜交瘤細胞,某些腫(zhong)瘤細胞和轉(zhuan)化細胞。

細胞(bao)呈(cheng)圓(yuan)形,一(yi)般不貼于支持(chi)物(wu)上,呈(cheng)懸(xuan)浮生長。這類細胞(bao)容易大量繁殖。

體外培(pei)(pei)養(yang)的(de)細(xi)胞(bao)類型中,少數細(xi)胞(bao)種(zhong)類在(zai)培(pei)(pei)養(yang)時(shi)不貼(tie)附于(yu)支持物上,而以(yi)懸(xuan)浮(fu)狀(zhuang)態(tai)生長(chang),包括一些(xie)取(qu)自血、脾或(huo)骨髓的(de)原代(dai)細(xi)胞(bao),尤其是血液(ye)白(bai)細(xi)胞(bao),以(yi)及一些(xie)腫瘤細(xi)胞(bao)。某些(xie)來源于(yu)此(ci)類細(xi)胞(bao)的(de)細(xi)胞(bao)株或(huo)細(xi)胞(bao)系也呈懸(xuan)浮(fu)狀(zhuang)態(tai)生長(chang)。

細胞(bao)懸浮(fu)生(sheng)長時可(ke)以呈單個細胞(bao)或(huo)細小的細胞(bao)團(tuan),胞(bao)體為圓形。其(qi)優點是在培養(yang)液(ye)中生(sheng)長,生(sheng)存空間大,允許長時間生(sheng)長,便于大量(liang)繁殖。

屬于懸浮型細胞常見的細胞株系有小鼠腹水瘤S180、小鼠骨髓瘤NS1和SP2/0,人造血系腫瘤細胞U937(見文章結尾圖片)、HL60、K562(見文章結尾圖片)等。技術詳情聯系靶點科技技術支持。

(二)貼壁型細胞

簡稱貼(tie)壁(bi)(bi)(bi)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)。在(zai)體外培(pei)養(yang)時,貼(tie)壁(bi)(bi)(bi)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)就是那些貼(tie)壁(bi)(bi)(bi)依賴(lai)的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao),在(zai)匯合成單層生長以前,它們的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)質膜超過30%的(de)表面與培(pei)養(yang)液底發生類似與細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)連接樣(yang)的(de)黏連,顯微視場下(xia)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)一般為扁平狀的(de)各種形(xing)態。需要注意的(de)是,貼(tie)壁(bi)(bi)(bi)型細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)匯合生長形(xing)成單層以后,失去接觸抑(yi)制的(de)那些細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)株或細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)系的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)物中,常(chang)常(chang)可見(jian)或多或少的(de)懸浮樣(yang)細(xi)(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)出現。

貼壁型細胞包括大多數哺乳動物的淋巴和血液以外的組織細胞,以及多數腫瘤細胞。需要貼附在帶適量正電荷的固體或半固體表面才能正常生長和分裂。
大多(duo)數培養(yang)細胞(bao)均為(wei)貼(tie)(tie)壁型,它們必須貼(tie)(tie)附(fu)在(zai)支持(chi)物(wu)表面生長(chang),這類細胞(bao)在(zai)體(ti)內(nei)時(shi)各(ge)自具有其特(te)殊的形(xing)態(tai),但(dan)在(zai)體(ti)外培養(yang)時(shi)貼(tie)(tie)附(fu)于支持(chi)物(wu)后(hou)形(xing)態(tai)上表現單一化而(er)失(shi)去體(ti)內(nei)原有的某(mou)些特(te)征(zheng),多(duo)呈上皮樣(yang)或成纖維細胞(bao)樣(yang)。

正常貼壁(bi)型細(xi)胞(bao)具有(you)接觸抑(yi)(yi)制(zhi)和密(mi)度抑(yi)(yi)制(zhi)的雙(shuang)重(zhong)特性,細(xi)胞(bao)相(xiang)互接觸后(hou)可抑(yi)(yi)制(zhi)細(xi)胞(bao)的運動,因此細(xi)胞(bao)不(bu)會相(xiang)互重(zhong)疊(die)于其(qi)上面生長(chang)(chang)。細(xi)胞(bao)生長(chang)(chang)、匯合成片后(hou),雖發生接觸抑(yi)(yi)制(zhi),但只要(yao)營養(yang)充分(fen),仍(reng)可增殖分(fen)裂(lie),但當細(xi)胞(bao)數量達到一定密(mi)度后(hou),由于營養(yang)的枯竭和代謝(xie)物的影響,細(xi)胞(bao)分(fen)裂(lie)停止,稱為密(mi)度抑(yi)(yi)制(zhi)。

腫瘤細(xi)胞的接觸抑制(zhi)及密(mi)度抑制(zhi)往往減(jian)弱或消失,因此細(xi)胞可向三維空間發展,導致細(xi)胞堆積,并可生(sheng)長至較高(gao)的終末細(xi)胞密(mi)度。

貼(tie)壁(bi)細胞類型有(you)以(yi)下幾(ji)種(zhong)常見類型

1.成纖維細胞型

細(xi)胞(bao)(bao)呈梭形、扇形、星形或不規則三角(jiao)形,中(zhong)央(yang)有卵圓形核,胞(bao)(bao)質常向外伸出3-5個長(chang)(chang)短不一的(de)(de)突起,生長(chang)(chang)時呈放(fang)射狀(zhuang)(zhuang)。細(xi)胞(bao)(bao)匯合過程中(zhong),細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)生長(chang)(chang)呈放(fang)射狀(zhuang)(zhuang)、火(huo)焰(yan)狀(zhuang)(zhuang)或漩(xuan)渦狀(zhuang)(zhuang)。

除了真(zhen)正(zheng)的(de)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)外,凡由(you)中胚層間(jian)充質起源的(de)組(zu)織,如心肌、平滑肌、成(cheng)骨細(xi)(xi)胞(bao)、血管內皮等常呈(cheng)成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)形(xing)態。培養中細(xi)(xi)胞(bao)的(de)形(xing)態與成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)類似(si)時皆可稱之為成(cheng)纖(xian)維(wei)細(xi)(xi)胞(bao)(圖(tu)10-2)。

2.上皮型細胞

細(xi)胞(bao)呈扁(bian)平不規則多邊形(xing),中央(yang)有圓形(xing)核(he),細(xi)胞(bao)外觀透明(ming),細(xi)胞(bao)彼此緊密相(xiang)連(lian)(lian)成(cheng)單(dan)層生長(chang)。生長(chang)時呈膜(mo)狀移動(dong),處于膜(mo)邊緣的細(xi)胞(bao)總與膜(mo)相(xiang)連(lian)(lian),很少單(dan)獨行動(dong)。起(qi)源于內、外胚層的細(xi)胞(bao)如皮(pi)膚表皮(pi)及其(qi)衍生物、消化管(guan)上(shang)皮(pi)、肝胰(yi)、肺泡(pao)上(shang)皮(pi)等皆成(cheng)上(shang)皮(pi)型形(xing)態(tai)。上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)傳代培養后形(xing)態(tai)特征(zheng)逐漸趨于典(dian)型。

3.游走細胞型

呈散在生長,一般不(bu)連成片,胞(bao)質常突起,呈活(huo)躍游走(zou)或變形(xing)運(yun)動,速度快且方向(xiang)不(bu)規則(ze)。此型細(xi)胞(bao)不(bu)穩(wen)定,有時難以和其他細(xi)胞(bao)相區別。起源于網狀內皮系統的(de)細(xi)胞(bao)屬(shu)于此類型。

4.多型細胞型

有(you)一些細(xi)胞(bao)(bao),如(ru)神經細(xi)胞(bao)(bao)難以確定其(qi)規律和穩定的(de)形態,統歸于此類。此類細(xi)胞(bao)(bao)在(zai)培(pei)養時,其(qi)形態結構容易受培(pei)養條(tiao)件(基質、溫(wen)度、pH、營養、污染狀況和培(pei)養方式(shi)等)影響。

如角膜(mo)上皮細胞在(zai)膠原基(ji)質上的(de)形(xing)態與體內天然形(xing)態相似,但在(zai)塑料(liao)基(ji)質表面細胞呈單層生長,細胞呈扁平形(xing)。上皮型(xing)Hela細胞在(zai)偏(pian)(pian)酸或偏(pian)(pian)堿的(de)培養環(huan)境下會(hui)停止生長,細胞形(xing)態呈梭形(xing)、不規則形(xing),及時糾正pH后(hou),細胞又恢復原來的(de)正常形(xing)態。

盡管懸浮(fu)細(xi)(xi)胞(bao)無須消化,但(dan)是對于有些實驗,需(xu)要(yao)像貼壁(bi)細(xi)(xi)胞(bao)一(yi)樣固(gu)定(ding)(ding)懸浮(fu)細(xi)(xi)胞(bao),困擾了很多實驗人員,于是有了細(xi)(xi)胞(bao)掉片一(yi)說。靶(ba)點(dian)科技懸浮(fu)細(xi)(xi)胞(bao)固(gu)定(ding)(ding)專用玻片Shi-Fix,給(gei)這個(ge)困擾提(ti)供了解決方(fang)(fang)案(an)。無論您是要(yao)固(gu)定(ding)(ding)懸浮(fu)細(xi)(xi)胞(bao)做免疫熒(ying)光(guang),還是固(gu)定(ding)(ding)懸浮(fu)便(bian)于刺激,亦或固(gu)定(ding)(ding)懸浮(fu)細(xi)(xi)胞(bao)用于接(jie)觸反應。靶(ba)點(dian)科技都能給(gei)您提(ti)供方(fang)(fang)案(an),期待(dai)您的咨詢(xun)。



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